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HPLC/UHPLC兼容色譜柱容量溫度和清洗

更新日期：2018-03-20 信息來(lái)源：本站瀏覽次數(shù)：3463

HPLC/UHPLC兼容色譜柱檢測(cè)的分辨率和靈敏度高，分析速度快，重復(fù)性好，定量精度高，應(yīng)用范圍廣。適用于分析高沸點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性、熱穩(wěn)定性差的化合物。

HPLC/UHPLC兼容色譜柱容量是指色譜柱對(duì)一種溶質(zhì)可容納的zui大量值，一旦超過(guò)此數(shù)值，該溶質(zhì)的色譜峰就會(huì)發(fā)生畸變，也就是說(shuō)該溶質(zhì)超載。超載的色譜峰并不均衡而且沿固定方向變化。

HPLC/UHPLC兼容色譜柱溫度極限：

一根色譜柱通常有兩個(gè)溫度極限，溫度下限和溫度上限。如果在低于溫度下限的條件下實(shí)驗(yàn)，得到的色譜峰又圓又寬(柱效降低)。但是色譜柱并不會(huì)受到什么損壞。這樣并不能發(fā)揮色譜柱的正常功能。在達(dá)到下限溫度或者高于下限溫度時(shí)，得到的色譜峰會(huì)有明顯的好轉(zhuǎn)。

HPLC/UHPLC兼容色譜柱清洗步驟：

1.每次清洗都用低流速起步，當(dāng)檢測(cè)到柱壓穩(wěn)定在一定水平后再增加流速。

2.先用10柱體積不含其它添加劑的流動(dòng)相中的弱溶劑，如正己烷、氯仿等反沖色譜柱。

3.再用20柱體積的諸如二氯甲烷或異丙醇等流動(dòng)相中的強(qiáng)溶劑反沖色譜柱。

4.100%異丙醇的極性和正相洗脫能力足夠把正相柱上的所有殘留物清洗掉。如果異丙醇的清洗還不足以恢復(fù)色譜性能，則說(shuō)明色譜柱柱床有塌陷和空洞了，用清洗的方法無(wú)法解決這個(gè)問(wèn)題。色譜癥狀和清洗再生過(guò)后的色譜性能恢復(fù)情況往往能提供色譜柱真正存在問(wèn)題的線索。

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